Transfektion
Transfektion är en laboratoriemetod där man för in främmande nukleinsyror, som DNA eller RNA, i eukaryota celler för att förändra deras egenskaper eller funktion. Tekniken är ett grundläggande verktyg inom molekylärbiologi och genteknik.
Ordet transfektion används om processen att introducera genetiskt material i celler med kärna, alltså eukaryota celler som djur- och växtceller. När motsvarande process sker i bakterier kallas den istället transformation, och när virus används som bärare talar man om transduktion. Syftet med transfektion är ofta att studera hur en viss gen fungerar, att få celler att tillverka ett önskat protein eller att stänga av en gen för att se vad som händer.
Det finns flera sätt att få in nukleinsyror genom cellmembranet, som annars stänger ute stora och laddade molekyler. Vid kemisk transfektion används till exempel positivt laddade fettmolekyler, så kallad lipofektion, eller kalciumfosfat som hjälper DNA att passera membranet. Vid fysikalisk transfektion kan man använda elektriska pulser, kallat elektroporation, som tillfälligt öppnar små porer i membranet, eller mikroinjektion där materialet sprutas direkt in i cellen.
Man skiljer också på transient transfektion och stabil transfektion. Vid den transienta varianten finns det infogade materialet kvar bara en kort tid och försvinner när cellerna delar sig. Vid stabil transfektion byggs det nya DNA:t in i cellens eget arvsmassa och förs vidare till alla dotterceller, vilket ger en bestående förändring.
Ett konkret exempel: en forskare vill veta om en viss mänsklig gen styr cellens tillväxt. Genen klistras in i en liten cirkulär DNA-ring, en så kallad plasmid, som blandas med ett lipidreagens. Blandningen droppas på odlade celler i en skål, och lipiderna hjälper plasmiden in i cellerna. Efter ett dygn kan forskaren mäta om cellerna börjat dela sig snabbare eller producera mer av ett protein.
Transfektion är också central i utvecklingen av moderna läkemedel och vacciner. När mRNA-vacciner tas fram används liknande lipidbaserade principer för att leverera RNA in i kroppens celler. Inom släktforskning och vanliga DNA-tester förekommer transfektion inte direkt, men metoden ligger bakom mycket av den grundforskning som gjort att vi idag förstår geners funktion och kan tolka genetiska analyser.